国产日韩欧美高清免费-欧美国产亚洲丝袜美腿一区-中文字幕高清在线日韩-欧美精彩视频免费观看

上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

【PCR檢測】病原微生物檢測操作方法
點(diǎn)擊次數(shù):151 更新時間:2024-12-11

多聚酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是一種模擬天然DNA復(fù)制過程,在體外擴(kuò)增特異性DNA(或RNA)片段的新技術(shù)。本實(shí)驗(yàn)是將待檢雙鏈DNA經(jīng)94℃高溫變性成單鏈作模板,然后加入一對人工合成的寡核苷酸引物,引物分別與待擴(kuò)增DNA片段的兩端互補(bǔ),經(jīng)55℃低溫退火,引物與模板互補(bǔ)結(jié)合。在72℃條件下,結(jié)合于模板上的引物在DNA聚合酶的催化下,利用反應(yīng)體系中的4種dNTP為原料,按堿基互補(bǔ)配對的方式延伸合成兩條新的DNA鏈。經(jīng)過20-30個周期后,特異的目的DNA可擴(kuò)增百萬倍以上。PCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后即可觀察到特異的擴(kuò)增條帶。

PCR方法操作簡便,靈敏度高,可檢測出少至0.1pg的目的DNA。目前已廣泛應(yīng)用于多種病原微生物及寄生蟲的檢測。

【材料】

1.無菌雙蒸水、石蠟油、溴化乙錠

2.10×PCR反應(yīng)緩沖液

3.25mmol dNTP混合液

4.引物1,引物2各50pmol/u1

5.模板DNA

6.5U/ul Taq DNA聚合酶

【儀器】

1.PCR擴(kuò)增儀

2.電泳儀

3.紫外線分析儀

【方法】

1.在0.5m1EP管中,加入以下成分:

10×PCR反應(yīng)緩沖液5u1

引物1 2ul

引物1 2ul

模板DNA 10u1

dNTP混合液4ul

Taq DNA聚合酶1ul

無菌雙蒸水加至50ul

混勻,加50 ul石蠟油,防止樣品水分蒸發(fā)。

2.將反應(yīng)管置于PCR儀中,94℃變性4min。然后按94℃變性30s→55℃退火30s→72℃延伸1min,循環(huán)35次后,72℃延伸10 min。

3.反應(yīng)完成后,取l0ul PCR擴(kuò)增液,加至2%瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳,電壓100V,電泳30~60min后,置紫外線分析儀下觀查擴(kuò)增結(jié)果。

上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 版權(quán)所有 地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機(jī):13310162040 聯(lián)系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網(wǎng)址:www.duolege.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標(biāo)準(zhǔn)品/化學(xué)試劑
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
手機(jī):13310162040
九九热这里有精品20| 亚洲av熟女一区二区三区蜜桃| 亚洲精品偷拍视频免费观看| 国产亚洲精品香蕉视频播放| 偷自拍亚洲欧美一区二页| 久久99这里只精品热在线| 欧美中文日韩一区久久| 亚洲国产一级片在线观看| 日本久久中文字幕免费| 亚洲香艳网久久五月婷婷| 精品人妻一区二区三区免费| 亚洲成人精品免费在线观看| 日本丁香婷婷欧美激情| 亚洲精品中文字幕熟女| 色涩一区二区三区四区| 国产免费自拍黄片免费看| 亚洲中文字幕在线视频频道| 亚洲一区二区精品久久av| 亚洲视频一级二级三级| 国产免费成人激情视频| 人妻少妇系列中文字幕| 欧美美女视频在线免费看| 国产精品国三级国产专不卡| 久久精品中文扫妇内射| 好吊妞视频只有这里有精品| 黑人粗大一区二区三区| 欧美一区二区不卡专区| 久久碰国产一区二区三区| 老熟女露脸一二三四区| 97精品人妻一区二区三区麻豆| 激情内射日本一区二区三区| 99久久精品午夜一区二区| 东京热一二三区在线免| 国产精品视频一区二区秋霞 | 日韩精品福利在线观看| 国产av熟女一区二区三区四区| 麻豆视传媒短视频免费观看| 国产av精品高清一区二区三区| 国产自拍欧美日韩在线观看| 欧美多人疯狂性战派对| 日韩精品一区二区不卡|